انجام تست MTT تست سمیت سلولی یا تست سنجش تکثیر و بقا سلولی

انجام تست MTT یا تست سنجش تکثیر و بقا سلولی در ساینس بازار به فروش میرسد.

.

ویدیو آموزشی تست MTT

.

تست MTT چیست؟

.

انجام تست MTT یا تست سنجش تکثیر و بقا سلولی در ساینس بازار به فروش میرسد. بررسی تکثیر و بقای سلولی (MTT Assay) یکی از مهمترین و اساسی‌ترین تکنیک­‌های انجام شده در آزمایشگاه‌های سلولی محسوب می‌شود. این بررسی نیازمند کمّی سازی دقیق تعداد سلول‌های زنده در محیط کشت سلولی است. اساس این روش مبتنی بر فعالیت میتوکندری می‌باشد. فعالیت میتوکندریایی در سلول­‌های زنده به صورت پایدار است و بنابراین افزایش یا کاهش تعداد سلول‌های زنده به صورت خطی با فعالیت میتوکندری در ارتباط می‌باشد. رنگ تترازولیموم MTT در سلول­‌های فعال (به لحاظ متابولیکی)، احیا می‌شود.

آزمایشگاه های تخصصی ساینس بازار آمادگی ارائه خدمات انجام تست سنجش تکثیر و بقا سلولی (MTT Assay) را به کلیه پژوهشگران، دانشجویان و اساتید جهت برطرف نمودن نیازهای پژوهشی این گروه دارد. شایان ذکر است درصورت نیاز تفسیر نتایج نیز توسط کارشناس این مرکز ارائه خواهد شد.

یک میلیون هزینه انجام یک پلیت 96 خانه میباشد و هزینه تجهیزات و ملزومات مصرفی با محقق میباشد و به پیش فاکتور اضافه خواهد شد.

جهت مشاهده روش عملی انجام تست MTT بصورت ویدیویی به آموزش تست MTT مراجعه نمایید.

.

شرایط ثبت سفارش انجام تست MTT

.

پژوهشگران محترم میتوانند انجام تست MTT را از صفر تا 100 به کارشناسان متخصص آزمایشگاه ساینس بازار بسپارند. ارائه خدمت و انجام تست MTT بطور کامل با استفاده از رده های سلول های موجود و تست سمیت با 6 گروه همراه با تحلیل نتایج با قیمت 4000000 تومان در خدمت پژوهشگران محترم قرار خواهد گرفت. رده های موجود در آزمایشگاه شامل موارد MCF7, U87, HFF, Hella, CHO می باشد.

در صورت نیاز به استفاده از رده های سلولی مورد نظر برای انجام تست MTT هزینه رده سلولی جداگانه محاسبه خواهد شد و قیمت تست در حدود 8000000 تومان در نظر گرفته میشود. این خدمت به پژوهشگران در سراسر کشور ارائه میشود.

همچنین پژوهشگران محترم میتوانند تنها از خدمت خوانش تست MTT با دستگاه میکروپلیت ریدر استفاده نمایند که با هزینه ناقابل 20000 تومان در اختیار پزوهشگران قرار خواهد گرفت. شایان ذکر است خدمت خوانش تست MTT تنها در شهر مشهد قابل ارائه می باشد.

.

اساس تست سمیت سلولی به روش MTT:

.

تست MTT یا تست سمیت سلولی یکی از پرکاربردترین تست‌های انجام شده در آزمایشگاه سلولی است. این تست با سنجش فعالیت متابولیکی سلول به عنوان یک مشخصه برای زنده بودن سلول، میزان بقای سلول را در یک آزمایش سلولی مشخص می‌کند. به طور معمول از این تست برای بررسی proliferation  و یا cytotoxicity استفاده می‌کنند. تست MTT بر اساس روش رنگ سنجی یا Colorimetry  بوده و اساس آن تبدیل نمک تترازولیوم زرد رنگ (diphenyltetrazolium bromide) یا همان معرف MTT، به کریستال‌های فرمازان بنفش رنگ در سلول‌های فعال است.

به طور کلی، تطبیق پذیری و سادگی سنجش MTT آن را به ابزاری ارزشمند برای محققان برای مطالعه فرآیندهای سلولی مختلف، ارزیابی اثربخشی دارو و ارزیابی سمیت در طیف وسیعی از تنظیمات تجربی تبدیل می‌کند.

.

کاربرد های تست MTT

.

1. غربالگری دارو Drug Screening:

سنجش MTT معمولاً در غربالگری دارو برای ارزیابی سمیت سلولی و اثربخشی کاندیدهای دارویی بالقوه استفاده می شود. محققان می‌توانند ترکیبات یا فرمول‌های دارویی مختلف را بر روی رده های سلولی مختلف آزمایش کنند تا تأثیر آن‌ها بر زنده‌مانی و تکثیر سلولی را تعیین کنند. این اطلاعات در شناسایی کاندیدهای دارویی امیدوارکننده برای توسعه بیشتر بسیار مهم است. سنجش MTT در کشف و توسعه دارو برای غربالگری ترکیبات درمانی بالقوه برای اثربخشی آنها در مهار رشد سلولی یا ترویج مرگ سلولی در سلول های سرطانی یا سایر بیماری ها استفاده می شود.

.

2. مطالعات تکثیر سلولی Cell Proliferation Assa:

سنجش MTT را می توان برای مطالعه تکثیر سلولی با نظارت بر تغییرات در بقای سلول در طول زمان مورد استفاده قرار داد. محققان می توانند اثرات فاکتورهای رشد، سیتوکین ها یا سایر محرک ها را بر رشد و تقسیم سلولی ارزیابی کنند. این اطلاعات برای درک مکانیسم های تکثیر و تمایز سلولی ضروری است.

.

3. تست سمیت سلولی Cytotoxicity Testing:

سنجش MTT در ارزیابی اثرات سیتوتوکسیک ترکیبات مختلف از جمله سموم محیطی، مواد شیمیایی و عوامل دارویی ارزشمند است. محققان می توانند غلظت سمی شدن یک ترکیب برای سلول ها را تعیین کنند و اطلاعات مهمی را برای ارزیابی ایمنی و ارزیابی خطر ارائه دهند. این روش همچنین برای ارزیابی اثرات سیتوتوکسیک درمان های مختلف بر روی سلول ها استفاده می شود. با اندازه گیری کاهش MTT به دلیل مرگ سلولی یا مهار متابولیسم سلولی، محققان می توانند سمیت مواد را ارزیابی کنند.

.

4. تشخیص آپوپتوز Assessment of Apoptosis:

سنجش MTT همچنین می تواند برای مطالعه آپوپتوز یا مرگ برنامه ریزی شده سلولی مورد استفاده قرار گیرد. تغییرات در حیات سلولی و فعالیت متابولیک می تواند نشان دهنده القای آپوپتوز در پاسخ به محرک ها یا درمان های مختلف باشد. محققان می توانند از روش MTT همراه با سنجش های دیگر برای بررسی مکانیسم های مرگ و بقای سلولی استفاده کنند.

.

5. مطالعات متابولیسم سلولی:

سنجش MTT اغلب برای ارزیابی متابولیسم سلولی و عملکرد میتوکندری به کار می رود. تغییرات در فعالیت متابولیک می تواند منعکس کننده تغییرات در تولید و استفاده از انرژی سلولی باشد. محققان می توانند از روش MTT برای مطالعه مسیرهای متابولیک، اختلال عملکرد میتوکندری و اثرات مهارکننده های متابولیک استفاده کنند.

.

6. ارزیابی زنده ماندن سلول Cell Viability:

سنجش MTT برای تعیین تعداد سلول های زنده در یک کشت با اندازه گیری فعالیت متابولیکی آنها استفاده می شود. سلول‌های سالم و فعال متابولیک، معرف MTT را به کریستال‌های فورمازان کاهش می‌دهند که می‌توان آن را به روش اسپکتروفتومتری اندازه‌گیری کرد.

.ّل

اصول روش انجام تست MTT

.ّل

برای انجام سنجش MTT، سلول ها در یک پلیت چند چاهکی قرار می گیرند و با ترکیب مورد نظر تیمار می شوند. پس از یک دوره انکوباسیون مشخص، معرف MTT (3-(4،5-دی متیل تیازول-2-ایل)-2،5-دی فنیل تترازولیوم بروماید) به سلول ها اضافه می شود و به مدت چند ساعت اجازه انکوبه می شود. سپس کریستال های فورمازان که از احیای MTT تشکیل می شوند با حلالی مانند دی متیل سولفوکسید DMSO حل می شوند و جذب محلول حاصل با استفاده از اسپکتروفتومتر اندازه گیری می شود.

مقدار فورمازان تولید شده به طور مستقیم با تعداد سلول‌های زنده در کشت متناسب است و به محققان اجازه می‌دهد تا میزان زنده‌مانی و تکثیر سلولی را تعیین کنند. سنجش MTT همچنین می تواند برای ارزیابی فعالیت متابولیک سلولی، عملکرد میتوکندری و مکانیسم های مرگ سلولی مورد استفاده قرار گیرد.

به طور کلی، سنجش MTT یک ابزار ارزشمند در تحقیقات زیست‌شناسی سلولی و کشف دارو است که اطلاعات ارزشمندی را در مورد اثرات ترکیبات مختلف بر زنده‌مانی و تکثیر سلولی ارائه می‌دهد. این یک روش همه کاره و پرکاربرد است که همچنان ابزار مهمی در مطالعه فرآیندهای سلولی و توسعه دارو است.

.ّل

محدودیت های تست MTT

.ّل

چندین محدودیت برای این روش وجود دارد که باید در نظر گرفته شود:

.ّل

1. تداخل با ترکیبات:

برخی از ترکیبات ممکن است با سنجش MTT تداخل داشته باشند که منجر به نتایج نادرست شود. برای مثال، برخی داروها یا مواد شیمیایی ممکن است با معرف MTT واکنش نشان دهند و نتایج مثبت یا منفی کاذب ایجاد کنند.

.ّل

2. عدم اختصاصیت:

سنجش MTT فعالیت متابولیک کلی در سلول ها را اندازه گیری می کند، اما اطلاعاتی در مورد فرآیندها یا مکانیسم های سلولی خاص ارائه نمی دهد. این می تواند تفسیر نتایج را محدود کند و تعیین علت دقیق تغییرات در زنده ماندن سلول را دشوار کند.

.ّل

3. تنوع در نتایج:

سنجش MTT می تواند به شرایط تجربی، مانند تراکم سلول، زمان انکوباسیون و دما حساس باشد. این می تواند منجر به تنوع در نتایج بین آزمایش ها شود و مقایسه داده های مطالعات مختلف را چالش برانگیز کند.

.ّل

4. محدوده دینامیکی محدود:

سنجش MTT دارای محدوده دینامیکی محدود است، به این معنی که ممکن است به اندازه کافی برای تشخیص تغییرات کوچک در زنده ماندن سلول حساس نباشد. این می تواند اندازه گیری دقیق تفاوت های ظریف در اثرات درمان یا مقایسه اثربخشی ترکیبات مختلف را دشوار کند.

.ّل

5. ناتوانی در تشخیص سلول های زنده و مرده:

سنجش MTT فعالیت متابولیکی را در سلول ها اندازه گیری می کند، اما بین سلول های زنده و مرده تمایز قائل نمی شود. این می تواند یک محدودیت در هنگام مطالعه مکانیسم های مرگ سلولی یا ارزیابی اثرات سیتوتوکسیک ترکیبات باشد.

.ّل

به طور کلی، در حالی که سنجش MTT ابزار ارزشمندی برای اندازه‌گیری زنده ماندن و تکثیر سلولی است، محققان باید از محدودیت‌های آن آگاه باشند و استفاده از روش‌های مکمل را برای تأیید نتایج و ارائه درک جامع‌تری از پاسخ‌های سلولی در نظر بگیرند.

.ّل

گروه های هدف استفاده از این خدمت:

.

کلیه گروه های علوم پایه نظیر میکروب شناسی، ایمنی شناسی، ژنتیک پزشکی، پزشکی ملکولی، فیزیولوژی، علوم اعصاب، انگل شناسی و قارچ شناسی، علوم تشریحی و بیولوژی سلولی، بیوشیمی بالینی، تغذیه، زیست فناوری و نانوفناوری پزشکی میتوانند با ثبت سفارش خرید انجام تست MTT از این خدمت استفاده کنند. همچنین گروه های پزشکی، فارماکولوژی و علوم دارویی نیز می‌توانند از خدمات ارائه شده فوق در پژوهش‌های تحقیقاتی استفاده نمایند.

پژوهشگران محترم سفارش خرید انجام تست MTT یا تست سمیت سلولی خود را در ساینس بازار ثبت کنند تا این تست در بازه زمانی 2 هفته ای توسط کارشناسان باتجربه ساینس بازار انجام شود. آنالیز تست MTT نیز در ساینس بازار به پژوهشگران محترم ارائه میشود.

.

مشاهده سایر خدمات تست های سلولی و مولکولی

.

شما پژوهشگر محترم میتوانید سایر خدمات انجام تست های آزمایشگاهی را از این لینک مشاهده نمایید. خدماتی نظیر انجام تست های PCR ژن های میکروبی (باکتری ، ویروس و قارچ) ، انجام تست های میکروبی نظیر انجام کشت باکتری ، انجام تست MIC و انجام تست MBC و … در ساینس بازار ارائه میشود.

خدمات آزمایشگاهی ایمونولوژی

خدمات آزمایشگاهی مولکولی

خدمات آزمایشگاهی میکروبی

خدمات آزمایشگاهی ویروسی

خدمات آزمایشگاهی سلولی