
تست تیول (Thiol Assay) برای اندازهگیری گروههای تیول (-SH) در پروتئینها و سایر ترکیبات زیستی استفاده میشود.
گروههای تیول نقش کلیدی در تنظیم وضعیت اکسیداتیو سلول، دفاع آنتیاکسیدانی و عملکرد پروتئینها دارند.
این روش معمولاً با استفاده از DTNB (5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid) یا Ellman’s Reagent) انجام میشود و با تشکیل رنگ زرد TNB، میزان تیول قابل سنجش طیفسنجی UV-Vis (412 nm) است.
سنجش میزان تیول Thiol در ساینس بازار به فروش میرسد. گروه های تیول پلاسما نیز یکی از نشانگرها در نتیجه آسیب رادیکال آزاد می باشد. این عوامل به آسیب اکسیداتیو حساس بوده و در نتیجه این آسیب ها کاهش مییابند. برای ارزیابی میزان تیول از DTNB (معرف Ellman) استفاده می شود. DTNB با این گروهها کمپلکس زرد ایجاد نموده که در طول موج nm 412 دارای ماکزیمم جذب است.
آزمایشگاه های تخصصی ساینس بازار آمادگی ارائه خدمات انجام سنجش میزان تیول Thiol را به کلیه پژوهشگران، دانشجویان و اساتید جهت برطرف نمودن نیازهای پژوهشی این گروه دارد. شایان ذکر است درصورت نیاز تفسیر نتایج نیز توسط کارشناس این مرکز ارائه خواهد شد.
.اندازه گیری تیول روشی است که برای ارزیابی سطح ترکیبات تیول در یک نمونه بیولوژیکی استفاده می شود. تیول ها ترکیبات آلی هستند که حاوی یک گروه سولفیدریل (-SH) مانند سیستئین و گلوتاتیون هستند که نقش مهمی در فرآیندهای مختلف بیوشیمیایی در بدن دارند. اندازه گیری سطح تیول می تواند اطلاعات ارزشمندی در مورد استرس اکسیداتیو، ظرفیت آنتی اکسیدانی و وضعیت کلی ردوکس در بدن ارائه دهد.
یکی از روشهای رایج برای اندازهگیری سطوح تیول، سنجش معرف المن است که شامل واکنش گروههای تیول با 5،5′-دی تیوبیس (2-نیتروبنزوئیک اسید) (DTNB) برای تولید یک محصول رنگی است که میتوان آن را به روش اسپکتروفتومتری اندازهگیری کرد. روش دیگر کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) است که می تواند ترکیبات مختلف تیول را در یک نمونه جدا و کمیت کند.
اندازه گیری تیول در محیط های تحقیقاتی و بالینی برای درک نقش تیول ها در بیماری ها و شرایط مختلف و همچنین نظارت بر اثربخشی درمان های آنتی اکسیدانی مهم است. تغییرات در سطح تیول می تواند نشان دهنده استرس اکسیداتیو، التهاب و سایر فرآیندهای پاتولوژیک باشد.
روش انجام و وسایل مورد نیاز سنجش میزان تیول Thiol
.وسایل مورد نیاز تست:
.الف) دستگاه پلیت ریدر EPOCH
ب) سمپلر
ج) پلیت 96 خونه
د) ترازوی دیجیتال
.مواد مورد نیاز تست:
.الف) تریس (Tris-base) ساخت شرکت Merck
ب) DTNB (2و2 دی تیو نیترو بنزوئیک اسید) ساخت شرکت Merck
ج) EDTA (اتیلن دی آمین تترا استیک اسید) ساخت شرکت Merck
د) متانول (CH3OH) ساخت شرکت Merck
.روش کار سنجش میزان تیول Thiol
.1- اول بافر Tris-EDTA با 3 گرم تریس ، 0.05 گرم EDTA و 100 میلی لیتر آب مقطر تهیه می شود.
2-سپس 50 میکرولیتر نمونه همگن بافتی با 1 میلی لیتر بافر Tris-EDTA مخلوط می شود. جذب نوری آن در طول موج 412 نانومتر به کمک دستگاه plate reader خوانده و به عنوان A1 در نظر گرفته می شود.
3- در ادامه، جذب DTNB (دی تیونیتروبنزوئیک اسید) به تنهایی به عنوان B (بلانک) در نظر گرفته می شود.
4- 20 میکرولیتر DTNB (دی تیونیتروبنزوئیک اسید) به نمونه اضافه می شود و پس از 15 دقیقه انکوبه در دمای اتاق مجددا” جذب نوری در 412 نانومتر قرائت و به عنوان A2 در نظر گرفته می شود
5- با فرمول زیر میزان غلظت تیول بر حسب میکرومول بر گرم محاسبه می شود.
Total thiol concentration (µM/g)= (A1-A2-B) ×
13.6: ضریب جذب میلی مولار
کلیه گروه های علوم پایه نظیر فیزیولوژی، میکروب شناسی، ایمنی شناسی، ژنتیک پزشکی، پزشکی ملکولی، علوم اعصاب، انگل شناسی و قارچ شناسی، علوم تشریحی و بیولوژی سلولی، بیوشیمی بالینی، تغذیه، زیست فناوری و نانوفناوری پزشکی میتوانند از این خدمت استفاده کنند. همچنین گروه های پزشکی، فارماکولوژی و علوم دارویی نیز میتوانند از خدمات ارائهی فوق در پژوهشهای تحقیقاتی استفاده نمایند.
.مشاهده سایر خدمات ارزیابی انتی اکسیدانی
.تست های سنجش میزان مالون دی آلدهید MDA و تست ارزیابی ظرفیت آنتی اکسیدانی به روش DPPH نیز در ساینس بازار انجام میشود.
.شما پژوهشگر محترم میتوانید سایر خدمات انجام تست های آزمایشگاهی را از این لینک مشاهده نمایید. خدماتی نظیر انجام تست های PCR ژن های میکروبی (باکتری ، ویروس و قارچ) ، انجام تست های میکروبی نظیر انجام کشت باکتری ، انجام تست MIC و انجام تست MBC و … در ساینس بازار ارائه میشود.
| نوع نمونه | نمونه بافتی اولیه هموژن نشده, نمونه بافتی هموژن و آماده سازی شده |
|---|---|
| کاربرد | اندازهگیری سطح تیولهای کل و پروتئینی بررسی استرس اکسیداتیو و وضعیت آنتیاکسیدانی سلول تحقیقات بیوشیمیایی و داروشناسی ارزیابی اثر داروها و ترکیبات آنتیاکسیدانی مطالعه آسیب اکسیداتیو در بافتها و مدلهای بیماری |
| ردیف | نام عضو هیئت علمی | دانشگاه | رشته تحصیلی | استنادات | صفحه عضو هیئت علمی |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | شبنم محمدی | مشهد | دکترای تخصصی (PhD) / علوم تشریحی | 590 | مشاهده پروفایل |
| 2 | محمدعلی ابراهیم زاده معبود | مازندران | دکترای تخصصی داروسازی / شیمی دارویی | 8994 | مشاهده پروفایل |
| 3 | ابوالقاسم جویبان | تبریز | دکترای تخصصی داروسازی / شیمی دارویی | 21098 | مشاهده پروفایل |
| 4 | مسعود امانلو | تهران | دکترای تخصصی داروسازی / شیمی دارویی | 5461 | مشاهده پروفایل |
| 5 | سمیه تاجیک | کرمان | دکترای تخصصی (PhD) / شیمی تجزیه | 10551 | مشاهده پروفایل |
| 6 | محسن امینی | تهران | دکترای تخصصی داروسازی / شیمی دارویی | 9143 | مشاهده پروفایل |
استعلام بگیرید: 09351245541
آیا مطمئن هستید که میخواهید این محصول را از سبد خرید حذف کنید؟