پلاسمید TRE-KRAB-dcas9-IRES-GFP

پلاسمید TRE-KRAB-dcas9-IRES-GFP در ساینس بازار به فروش میرسد.

معرفی محصول

.

پلاسمید TRE-KRAB-dCas9-IRES-GFP یک ساختار ژنتیکی است که در تحقیقات زیست شناسی مولکولی برای ویرایش ژن و مطالعات بیان ژن استفاده می شود.

به طور کلی، پلاسمید TRE-KRAB-dCas9-IRES-GFP را می توان برای مطالعه تنظیم ژن با اجازه دادن به بیان القایی پروتئین همجوشی dCas9-KRAB و تجسم سلول هایی که این ساختار را از طریق فلورسانس GFP بیان می کنند، مورد استفاده قرار داد.

.

کاربرد محصول 

.

پلاسمید TRE-KRAB-dcas9-IRES-GFP یک نوع پلاسمید بیانی یوکاریوتی CRISPR قابل استفاده در تولید لنتی‌ویروس‌های بیان کننده سیستم KRAB (تحت کنترل پروموتر TRE3G) می‌باشد و 14628 جفت باز طول دارد. باتوجه به قابلیت KRAB در سرکوب بیان ژن، این پلاسمید به منظور مطالعات ژنومیک کاربردی و خاموش‌سازی بیان ژ‌ن‌های هدف به کار می‌رود.

این وکتور دارای مارکر انتخابی GFP می‌باشد که غربالگری سلول‌های ترانسفکت‌شده را به کمک FACS و فلوسیتومتری تسهیل می‌کند.

این پلاسمید واجد مارکر مقاومت به آمپی‌سیلین است و در نتیجه باکتری E.Coli حاوی این پلاسمید را باید در محیط LB Agar حاوی آنتی‌بیوتیک کانامایسین با غلظت 50-100 میکروگرم در هر میلی‌لیتر و در دمای 37 درجه سانتیگراد کشت داد. سویه باکتری مناسب برای این وکتور XL1 Blue است.

.

ژن های پلاسمید TRE-KRAB-dcas9-IRES-GFP

.

در اینجا به تفکیک اجزای این پلاسمید می پردازیم:

1. TRE : مخفف ژن پاسخ تتراسایکلین است که یک توالی DNA تنظیمی است که به حضور تتراسایکلین یا داکسی سایکلین پاسخ می دهد. معمولاً برای کنترل بیان ژن ها به روش القایی استفاده می شود.

2. KRAB: مخفف جعبه مرتبط با Krüppel است که یک دامنه سرکوب کننده رونویسی است که می تواند با پروتئین متصل به DNA مانند dCas9 ترکیب شود تا بیان ژن را خاموش کند.

3. dCas9: مخفف Cas9 مرده کاتالیزوری است که یک نسخه اصلاح شده از پروتئین Cas9 از سیستم CRISPR/Cas9 است که توانایی اتصال به DNA خود را حفظ می کند اما توانایی جدا کردن DNA را ندارد. اغلب به عنوان یک ابزار تنظیم ژن برای فعال سازی یا سرکوب رونویسی هدفمند استفاده می شود.

4. IRES: مخفف محل ورود ریبوزوم داخلی، که دنباله ای است که امکان ترجمه چندین پروتئین از یک رونوشت mRNA را فراهم می کند. در این مورد، امکان ترجمه پروتئین dCas9 و GFP (پروتئین فلورسنت سبز) از mRNA یکسان را فراهم می کند.

5. GFP: مخفف Green Fluorescent Protein است که یک ژن گزارشگر معمولی است که وقتی در معرض طول موج های خاصی از نور قرار می گیرد فلورسانس سبز ساطع می کند. اغلب برای تجسم بیان ژن یا محلی سازی پروتئین در سلول ها استفاده می شود.

.

سایر محصولات

.

جهت مشاهده سایر کیت های تشخیصی به روش PCR اینجا را کلیک کنید.