کیت پلاسمید Px459

پلاسمید Px459 در ساینس بازار به فروش میرسد.

معرفی محصول

.

پلاسمید PX459 یک پلاسمید متداول در تحقیقات زیست شناسی مولکولی است. این یک ناقل لنتی ویروسی است که حاوی ژن Cas9 و یک کاست بیان RNA راهنما است. این پلاسمید اغلب برای آزمایش های ویرایش ژن CRISPR/Cas9 استفاده می شود.

.

کاربرد محصول 

.

پلاسمید pX459 که با نام پلاسمید pSpCas9(BB)-2A-Puro نیز شناخته می‌شود، امکان انتقال و بیان همزمان کاست بیان‌کننده spCas9 (تحت کنترل پروموتر CMV) و توالی‌های sgRNA (تحت کنترل پروموتور U6) را فراهم می‌سازد.

این پلاسمید واجد توالی کدکننده پورومایسین نیز می‌باشد که با واسطه توالی T2A به توالی spCas متصل بوده و تحت کنترل پروموتر CMV می‌باشد. پس از بیان توالی spCas-puromycin با تجزیه توالی T2A این دو پروتئین از هم جدا شده و spCas9 فعالیت نوکلئازی خود را ایفا می‌کند. این خصوصیت باعث کاهش طول پلاسمید به 9174 جفت باز شده‌است که انتقال پلاسمید به سلول هدف را تسهیل می‌کند.

مارکر GFP پایش ورود پلاسمید به سلول‌های هدف و همچنین جداسازی و تخلیص سلول‌های دریافت‌کننده پلاسمید را امکان پذیر می‌کند.

این پلاسمید واجد مارکر مقاومت به آمپی‌سیلین است و در نتیجه باکتری E.Coli حاوی این پلاسمید را باید در محیط LB Agar حاوی آنتی‌بیوتیک کانامایسین با غلظت 50-100 میکروگرم در هر میلی‌لیتر و در دمای 37 درجه سانتیگراد کشت داد. سویه باکتری مناسب برای این وکتور XL1 Blue است.

.

کاربرد پلاسمید در مهندسی ژنتیک

.

پلاسمیدها معمولاً در مهندسی ژنتیک برای کاربردهای مختلف استفاده می شوند. برخی از کاربردهای کلیدی پلاسمیدها در مهندسی ژنتیک عبارتند از:

1. شبیه سازی ژن: پلاسمیدها به عنوان ناقل برای شبیه سازی و تکثیر ژن های مورد نظر استفاده می شوند. ژن مورد نظر با استفاده از آنزیم های محدود کننده و لیگاز وارد پلاسمید می شود و یک مولکول DNA نوترکیب ایجاد می کند که می تواند در سلول های میزبان تکثیر شود.
.

2. بیان ژن: از پلاسمیدها می توان برای بیان ژن های مورد علاقه در سلول های میزبان استفاده کرد. با قرار دادن ژن تحت کنترل پروموترها و عناصر تنظیم کننده خاص بر روی پلاسمید، محققان می توانند بیان ژن را القا کرده و عملکرد آن را مطالعه کنند.

.

3. تولید پروتئین: از پلاسمیدها می توان برای تولید پروتئین های نوترکیب در مقادیر زیاد استفاده کرد. با قرار دادن ژن کد کننده پروتئین مورد نظر در یک پلاسمید، محققان می توانند پروتئین را برای کاربردهای مختلف مانند توسعه دارو یا مطالعات بیوشیمیایی بیان و خالص کنند.

.

4. ویرایش ژن: پلاسمیدها، مانند آنهایی که حاوی اجزای CRISPR/Cas9 هستند، برای برنامه های ویرایش ژن استفاده می شوند. با تحویل پلاسمید به سلول ها، محققان می توانند تغییرات هدفمندی را در ژنوم ایجاد کنند و امکان ویرایش دقیق ژن و مطالعات عملکردی را فراهم کنند.

.

5. مطالعات زیست شناسی مولکولی: پلاسمیدها ابزارهای ارزشمندی برای مطالعه تنظیم ژن، برهمکنش های پروتئین-پروتئین و سایر فرآیندهای زیست شناسی مولکولی هستند. محققان می توانند پلاسمیدهایی با ویژگی های خاص برای بررسی مکانیسم های مختلف بیولوژیکی طراحی کنند.

.

به طور کلی، پلاسمیدها با امکان دستکاری، بیان و تجزیه و تحلیل ژن ها در طیف گسترده ای از موجودات، نقش مهمی در مهندسی ژنتیک ایفا می کنند.

.

سایر محصولات

.

جهت مشاهده سایر کیت های تشخیصی به روش PCR اینجا را کلیک کنید.