محصول کیت آزمایشگاهی الایزا کوید 19

.کیت الایزا کوید 19 جهت تشخیص کيفي وجود آنتي‌بادي هاي IgM عليه ويروس SARS CoV-19 عامل بيماري 19-COVID در سرم يا پلاسماي انسان طراحي شده است. اين کيت به عنوان يک ابزار کمکي در تشخيص بيماران مبتلایان به بيماري19-COVID در ترکيب با ساير تظاهرات باليني به کار مي‌رود.

.ویروس SARS CoV-19:

.ویروس SARS CoV-19 در سال ۲۰۱۹ در ووهان چین کشف شد و عامل بیماری 19-COVID می‌باشد. این ویروس یک کورونا ویروس RNA دار تک رشته‌ای است. ژنوم این ویروس شباهت بسیاری با دیگر کورونا ویروس‌ها به ویژه ویروس SARS-CoV و ویروس‌های کورونای خفاش دارد. این ویروس در انسان باعث ایجاد عفونت و مشکلات تنفسی شدیدی می‌شود.

.ساختار ویروس:

.پروتئین‌ها (آنتی‌ژن‌) های زیادی در ساختار این ویروس شرکت دارند که شامل آنتی‌ژن  M) membrane ,(E) envelope ,(S) spike) و (N) nucleocapsid می‌باشند. تحقيقات نشان داد هوموتریمرهای پروتئین S که یک پروتئین به شدت گلیکوزیله می‌باشد نقش مهمی در ورود ویروس با اتصال به گیرنده هدف در سطح سلول بازی می‌کند. به نظر میرسد پروتئین S نقش اصلی را در تعامل با سلول‌های میزبان دارد. از این رو، پروتئین S بخصوص قطعه (Receptor-Binding-Domain (RBD دارای ویژگی ایمنوژنیسیته بسیار بالایی است که منجر به تولید طیف متنوعی از آنتی‌بادی‌های گر می‌شود. دومین پروتئین  spike (S1)، برای تشخیص سرولوژیکی آنتی‌بادی‌های SARS CoV-19 از پروتئین‌های S با طول کامل بسیار محافظت شده، اختصاصی‌تر است.
از طرف دیگر ، آنتي‌ژن N به عنوان یکی از فراوان‌ترين آنتي‌ژن‌های اين ويروس، بهترين گزينه براي استفاده در روش‌هاي تشخيصي ايمونولوژيک مي‌باشد. اين ويروس از طريق انتقال فرد به فرد و توسط قطرات (Droplets) تنفسي با سرفه يا عطسه‌ي بيماران مبتلا به اين عفونت افراد جديد را آلوده مي‌کند.

سيستم ايمني انسان در مقابله با اين ويروس دو نوع آنتي‌بادي IgM و IgG را توليد و به سيستم گردش خون وارد مي‌کند. وجود آنتي‌بادي‌هاي IgG وIgM عليه اين ويروس نشان دهنده‌ي تماس فرد با ويروس و ايجاد پاسخ سيستم ايمني بدن بر عليه ويروس مي‌باشد.

.اساس آزمایش:

..این کیت به روش Antibody capture  طراحی شد . چاهک‌های پلیت با Anti-human-IgM antibody  پوشش می‌یابد. سپس، نمونه‌ها در داخل چاهک رقیق می‌شوند. تمامی IgM های موجود در نمونه سرم از جمله IgM های ضد SARS CoV-19 به آنتی‌بادی‌های کف چاهک متصل می‌شوند.

پس از شستشوی اولیه، آنتی‌بادی‌های باند نشده جدا شده و در مرحله بعد کنژوگه کیت که شامل آنتی ژن‌های نوکلئوکپسید N و اسپایک S ویروس SARS CoV-19 کنژوگه با HRP می‌باشد، اضافه می‌گردد که آنتی‌ژن‌های فوق به IgM اختصاصی SARS CoV-19 متصل می‌شود و ایجاد کمپلکس می‌نماید .

پس از شستشو محلول رنگزا که حاوي هیدروژن پراکسید (2O2H) وکروموژن است داخل چاهک‌ها ریخته می‌شود که رنگ آبی متناسب است با کمپلکس ایمنی که در چاهک‌ها تشکیل می‌شود. با افزودن محلول متوقف کننده، رنگ آبی به زرد تبدیل می‌شود که بهترین جذب نوري را در طول موج 450 نانومتر دارد.

.محتویات کیت:

.

• یک عدد پلیت داراي 96 عدد چاهک پوششی با Anti-Human IgM .
• محلول آنزیم کنژوگه غلیظ (Enzyme conj 20x): ویال حاوی آنتی‌ژن‌های N و S ویروس، نشاندار با پراکسیداز در محلول بافری حاوی پروتئین و نگهدارنده.
• محلول رقیق کننده کنژوگه (Conj. Diluent): ویال حاوی محلول بافری دارای پروتئین و نگهدارنده.
• محلول رقيق كننده نمونه (Sample Diluent): ويال حاوي محلول، جهت رقيق كردن نمونه‌ها .
• سرم کنترل مثبت (Positive Control): ویال حاوی محلول بافری ، دارای پروتئین به عنوان پایدارگر و 0/05 % کاتن به عنوان ماده‌ی محافظ و سرم انسانی غیر فعال، حاوی آنتی‌بادی IgM علیه SARS CoV-19
• سرم کنترل منفی (Negative Control): ویال حاوی محلول دارای بافر فسفات و 0/05 % کاتن به عنوان ماده‌ی محافظ و سرم انسانی منفی از نظر آنتی بادی IgM علیه SARS CoV-19
• محلول رنگزاي یک مرحله‌اي (Chromogen-Substrate): یک ویال حاوي 12 میلی‌لیتر  (آماده‌ی مصرف)
• محلول شستشو (Wash Buffer): یک ویال حاوي محلول شستشوي غلیظ (10x)
• محلول متوقف کننده (Stop Solution): یک ویال حاوي 12 میلی‌لیتر اسید کلریدریک 1 نرمال.

.شرایط نگهداری:

.

• کیت را در یخچال بین دماي 2 تا 8 درجه سانتی گراد نگهداري نمایید.
• چاهک‌ها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداري نمایید.
• پایداري محتویات کیت تا پایان مدت انقضاي مندرج بر روي هر یک از آنها می‌باشد.

.نکات قابل ذکر برای مصرف کنندگان:

.

• محتویات این کیت تنها براي مصرف در همین کیت هستند.
• تمامی محتویات کیت تنها براي استفاده تشخیصی در آزمایشگاه می‌باشند .
• از مخلوط کردن محتویات کیت ها با شماره ساختهاي مختلف جداً خودداري نمایید .
• کلیه مواد موجود در کیت که منشاء سرمی دارند از نظر وجود HBsAg وآنتی بادیهاي HCV و HIV کنترل و فاقد این عوامل می‌باشند. جهت احتیاط بهتر است کاربرانی که با کیت کار می‌کنند از تماس مستقیم با مواد بپرهیزند و از وسایل ایمنی لازم در آزمایشگاه استفاده نمایند.