تست بندیکت چیست؟
تست بندیکت یک آزمایش مبتنی بر معرف شیمیایی است که برای تشخیص وجود قندهای کاهنده مانند گلوکز در محلول استفاده می شود. این معرف که محلول بندیکت نام دارد حاوی سولفات مس (II)، کربنات سدیم و سیترات سدیم است. هنگامی که با محلولی حاوی قند احیا کننده مخلوط می شود و حرارت می یابد، رسوب رنگی ایجاد می کند که نشان دهنده وجود شکر است. این آزمایش اغلب در آزمایشگاه برای آزمایش وجود قندهای کاهنده در نمونه های غذا و ادرار استفاده می شود.
ویدیو آموزش روش انجام تست بندیکت
معرفی تست بندیکت
تعیین قندهای کربوهیدراتی یک روش روتین برای تعیین قندهای متابولیکی قابل هضم در صنایع یا آزمایشگاههای تحقیقاتی است و برای مطالعه دینامیک قندهای مختلف به عنوان نشاندهنده وضعیت متابولیکی و میزان قندهای کربوهیدراتی در منابع جایگزین انرژی، اهمیت دارد. این روش که برای قندهای کاهنده بکار می رود جهت تشخیص کیفی گلوکز در ادرار توسعه داده شد. این روش هنوز در تعیین کیفی قندهای کاهنده در بخشهای بالینی، صنعت و تحقیقات استفاده میشود. مکانیسم واکنش بر اساس ظرفیت کاهندگی گروههای کربونیل آزاد در گلوکز است، که قادرند یک طیف گسترده از یونهای فلزی از جمله Cu2+ را کاهش دهند. در محیط قلیایی، مس به Cu+ کاهش مییابد و به عنوان Cu2O رسوب میکند. کاربرد اصلی ترکیب بندیکت، تشخیص سریع قندهای کاهنده با تغییر رنگ با استفاده از مواد قلیایی پایدار که خوردگی کمی دارند می باشد.
خرید معرف بندیکت
معرف کمی بندیکت حاوی تیوسیانات پتاسیم است و برای تعیین حضور قند کاهنده استفاده می شود. این محلول یک رسوب تیوسیانات مس را تشکیل می دهد که سفید است و می تواند در تیتراسیون استفاده شود. تیتراسیون باید به جای نمونه از محلول گلوکز 1% برای کالیبراسیون استفاده شود.
.
معرف بندیکت در ساینس بازار به آدرس فروش محلول بندیکت انجام میشود.
اصول آزمایش بندیکت چیست؟
کربنات سدیم موجود در معرف بندیکت باعث افزایش PH مخلوط محلول نمونه و معرف می شود. در شرایط قلیایی گرم، قندهای احیاکننده به عوامل کاهنده قوی یعنی اندیولها تبدیل میشوند. این اندیولها یونهای مس (Cu2+) (موجود به عنوان سولفات مس (CuSO4)) معرف بندیکت را به یونهای مس (Cu+) کاهش میدهند. ذرات مس به شکل اکسید مس (I) نامحلول یا اکسید مس (Cu2O) که رنگ قرمز دارد وجود دارد. این اکسیدهای مس قرمز رنگ رسوب می کنند.
غلظت قند احیا کننده در نمونه با شدت و سایه رنگ مخلوط واکنش متفاوت است. از این سایه رنگ می توان برای تخمین غلظت قند احیا کننده در نمونه استفاده کرد. رنگ ممکن است از سبز مایل به زرد تا قرمز نارنجی تا قرمز آجری متفاوت باشد. با افزایش غلظت قند کاهنده، رنگ به تدریج از سبز به زرد تا نارنجی به قرمز آجری تغییر می کند.
روش تهیه محلول بندیکت
- 17.3 گرم سولفات مس (CuSO4)، 173 گرم سیترات سدیم (Na3C6H5O7) و 100 گرم کربنات سدیم بی آب (Na2CO3) را اندازه گیری کنید.
- سیترات سدیم و کربنات سدیم بی آب را به کمک حرارت در 800 میلی لیتر آب حل کنید و ترجیحا از صافی عبور دهید.
- حجم را به 850 میلی لیتر برسانید.
- سولفات مس را در 100 میلی لیتر آب جداگانه حل کنید سپس آن رادر حالی که مرتبا هم میزنید در محلول اول بریزید.
- در نهایت حجم را به یک لیتر برسانید.
مواد و تجهیزات لازم جهت انجام آزمایش
- نمونه مجهول
- همزن شیشه ای
- لوله آزمایش
- پیپت
- حمام آب گرم
- محلول بندیکت
روش انجام آزمایش
- یک میلی لیتر از نمونه را در یک لوله آزمایش خشک بردارید
- یک میلی لیتر گلوکز 5 درصد و 1 میلی لیتر آب مقطر را در دو لوله آزمایش خشک جداگانه مصرف کنید.
- دو میلی لیتر از معرف بندیکت را به تمام لوله های آزمایش اضافه کنید.
- لوله های آزمایش حدود 5 دقیقه در حمام آب قرار می گیرند.
- ایجاد رسوب رنگ قرمز آجری نشان دهنده یک نتیجه مثبت است.
تفسیر نتایج تست بندیکت
احتیاطات لازم جهت انجام آزمایش
- اندازه گیری باید دقیق باشد.
- مخلوط را به سرعت گرم نکنید. بهتر است روی یک حمام آب به آرامی گرم کنید.
- در حین گرم کردن محلول، از نگهدارنده لوله آزمایش استفاده کنید.
- هنگام گرم کردن لوله آزمایش را به سمت خود یا دیگران قرار ندهید.
- گرمایش باید حداقل سه بار قبل از گزارش منفی انجام شود.
محدودیت های انجام آزمایش
- نتیجه مثبت کاذب ناشی از واکنش با داروهایی مانند پنی سیلین، ایزونیازید، استرپتومایسین، اسید سالیسیلات ها و پارا آمینو سالیسیلیک اسید
- مواد شیمیایی موجود در ادرار مانند کراتینین، اسید اسکوربیک و اورات باعث تاخیر در واکنش بندیکت می شود.
- غلظت دقیق قند احیا کننده را نمی توان اندازه گیری کرد. فقط یک مقدار نیمه کمی تخمینی را می توان نشان داد.
- برای شناسایی کربوهیدرات نیاز به آزمایش بیشتری دارد.
مزیت استفاده از آزمایش بندیکت
- یک آزمایش ساده که به مواد کمتر و زمان کمتر نیاز دارد
- معرف های غیر سمی
- ارزان
- ارزیابی کیفی و نیمه کمی
- در تشخیص کربوهیدرات های ناشناخته در تجزیه و تحلیل بیوشیمی
کاربرد بالینی استفاده از آزمایش بندیکت
- غربالگری بیماران مبتلا به گالاکتوزمی
Usefulness of Benedict’s test for the screening of galactosemia.pdf
- تشخیص بالینی دیابت ملیتوس
- شناسایی گلوکز در ادرار
https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-981-10-8186-6_12
کنترل کیفی آزمایش
متغیرهای کنترل شده عبارتند از: غلظت ید / حجم محلول / زمان در حمام آب / معرف بندیکت (یا پیشنهاد منطقی دیگر). غلظت ید با استفاده از محلول یکسان و هر بار رقیق شدن به همان میزان کنترل شد.
.
مقالات مرتبط
.
برای مشاهده مقالات مرتبط کلیک کنید
.