معرفی محصول وکتور پلاسمید pX601-mCherry خطی شده

تمامی پلاسمیدها در ابتدا به صورت DNA حلقوی هستند و برای کلونینگ هر توالی هدف نیاز به وکتور خطی شده می‌باشد. خطی شدن وکتور توسط آنزیم‌های محدود کننده صورت می‌گیرد. هر وکتوری دارای جایگاه برش برای تعدادی آنزیم مشخص است؛ که شناسایی نوع آنزیم و جایگاه برش آن‌ها از روی نقشه وکتور امکان پذیر است.

.کاربرد محصول

.پلاسمید DR274 یک وکتور اختصاصی برای تولید مولکول‌های sgRNA است. با استفاده از این پلاسمید می‌توان مولکول‌های sgRNA را در شرایط آزمایشگاهی تولید کرد تا با تزریق به سلول‌های هدف (به همراه پروتئین یا mRNA کد کننده پروتئین Cas9) ژن‌های دلخواه را با کارایی بالا هدف‌گیری کرد.

با سفارش این محصول شما می‌توانید با هزینه بسیار کمتر و با سرعت بیشتر، کلونینگ تمام sgRNA های طراحی و هیبرید شده خود را به داخل این وکتور انجام دهید.

علاوه بر این شما می‌توانید با سفارش طراحی و تولید sgRNAهای موردنظر خود به متخصصین، وکتور کلون شده را در اسرع وقت تحویل بگیرید.

فرایند کلی تولید مولکول‌ sgRNA با استفاده از این پلاسمید شامل طراحی توالی‌های sgRNA، سنتز توالی‌های sense و antisense کد کننده sgRNA (به همراه توالی‎‌های انتهای چسبان سازگار با انتهاهای پلاسمید)، هیبریداسیون این قطعات، اتصال مولکول دو رشته‌ای حاصل به پلاسمید DR274 خطی شده با آنزیم BsaI، و در نهایت in vitro transcription و تولید مولکول sgRNA می‌باشد.

این پلاسمید واجد مارکر مقاومت به کانامایسین است و در نتیجه باکتری E.Coli حاوی این پلاسمید را باید در محیط LB Agar حاوی آنتی بیوتیک کانامایسین با غلظت 50 میکروگرم در هر میلی لیتر و در دمای 37 درجه سانتیگراد کشت داد. سویه باکتری مناسب برای این وکتور XL1 Blue است.

شما محققین علاقه‌مند به تحقیقات ویرایش ژنی و ژن‌ درمانی در یوکاریوت‌ها و حتی ماهی گورخری (ZebraFish)، می‌توانید وکتور DR274 را به صورت کشت مایع، کلونی روی پلیت آگار و حتی به صورت وکتور خطی شده قابل فروش است.

وکتور پلاسمیدی چیست؟

.ناقل پلاسمید یا plasmid vector یک مولکول DNA کوچک و حلقوی است که معمولاً در تحقیقات زیست شناسی مولکولی برای تکثیر و انتقال ژن ها بین موجودات استفاده می شود. پلاسمیدها اغلب از باکتری ها مشتق می شوند و می توانند توالی های DNA خارجی مانند ژن های مورد نظر یا نشانگرهای ژنتیکی را حمل کنند که می توانند با استفاده از آنزیم های محدود کننده و DNA لیگاز وارد پلاسمید شوند.

ناقل های پلاسمید معمولاً حاوی چندین عنصر کلیدی هستند:

.1. منشا همانندسازی Origin of replication (ori) : این یک توالی DNA خاص است که به پلاسمید اجازه می دهد مستقل از DNA کروموزومی سلول میزبان تکثیر شود.

.2. نشانگر انتخابی Selectable marker: ژنی که ویژگی قابل انتخابی مانند مقاومت در برابر آنتی بیوتیک را ایجاد می کند که به محققان اجازه می دهد به راحتی سلول هایی را که پلاسمید را گرفته اند شناسایی کنند.

3. محل شبیه سازی چندگانه Multiple cloning site (MCS): این ناحیه از ژن به عنوان پلی لینکر polylinker نیز شناخته می شود، این ناحیه حاوی چندین سایت شناسایی آنزیم محدود کننده منحصر به فرد است که می توان DNA خارجی را در آن وارد کرد.

.4. پروموتر Promoter: توالی DNA که رونویسی ژن درج شده را آغاز می کند.

5. ژن گزارشگر Reporter gene: ژنی که پروتئین یا آنزیم قابل تشخیصی مانند پروتئین فلورسنت سبز (GFP) تولید می کند که به محققان امکان تجسم بیان ژن را می دهد.

.وکتورهای پلاسمید ابزارهای همه کاره در زیست شناسی مولکولی هستند و برای کاربردهای مختلفی از جمله شبیه سازی ژن، بیان پروتئین، ویرایش ژن (مانند CRISPR) و ژن درمانی استفاده می شوند. محققان می توانند ناقل های پلاسمید را با اصلاح اجزای آنها برای مطابقت با نیازهای آزمایشی خاص سفارشی کنند.

.سایر محصولات و کیت های مهندسی ژنتیک

.فروش سایر کیت های مهندسی ژنتیک ساخت شرکت دانش بنیان سیم بیولب در ساینس بازار قابل تهیه است. (لینک خرید کیت های مهندسی ژنتیک)