آنالیز کلونی زایی سلول

.

معرفی خدمت:

.

آنالیز کلونی زایی سلول (clonogenic assay) جهت سنجش تشکیل کلونی رده‌های سلولی مختلف از جمله رده لنفوسیتی است. همچنین این تست در ارزیابی سمیت سلولی و سنجش بقای رده‌های سلولی سالم و توموری در شرایط آزمایشگاهی کاربرد دارد.

.

تست کلنی‌زایی:

.

این روش برای اولین بار در دهه 1950 توصیف شد و برای مطالعه اثرات تابش اشعه بر بقا و رشد سلول‌های سرطانی مورد استفاده قرار گرفت و متعاقباً نقش اساسی در حوزه رادیوبیولوژی ایفا کرد. اساس این تست، سنجش توانایی یک سلول منفرد برای رشد و تشکیل کلنی است. قابل ذکر است هر کلنی از حداقل 50 سلول تعریف شده است.

.

روش انجام تست کلونی‌ زایی:

.

آنالیز کلونی زایی سلول اساساً توانایی هر سلول در جمعیت را برای انجام تقسیم بصورت “نامحدود” آزمایش می‌کند. یکی از کاربردهای اصلی روش کلونوژنیک به عنوان روش انتخابی برای تعیین مرگ باروری سلولی پس از درمان با پرتوهای یونیزان است. اگرچه تست کلنی‌زایی می‌تواند برای تعیین اثربخشی سایر عوامل سیتوتوکسیک بر سلول زنده در شرایط آزمایشگاهی نیز استفاده شود.

در هنگام کشت سلول در ظرف کشت (فلاسک) تنها کسری از سلول‌های کشت و چسبیده‌ به سطح ظرف کشت، ظرفیت و توانایی تولید کلنی خود را حفظ می‌کنند. از این رو برای اندازه‌گیری کلون زایی، سلول‌ها باید با تراکم بسیار کم کشت شوند (seed شوند) و به مدت 1-3 هفته رها شوند تا کلنی‌ها تشکیل شوند. جهت شمارش کلنی‌هایی که تشکیل می‌شوند بایستی کلنی‌ها رنگ آمیزی شوند تا در زیر میکروسکوپ شمارش شوند. برای این منظور ابتدا کلنی‌ها با محلول گلوتارآلدئید (6.0% V/V) تثبیت می‌شوند. سپس در مرحله بعد با رنگ کریستال ویوله بنفش (0.5% w/v) رنگ آمیزی می‌شوند. در این مرحله کلنی‌ها آماده‌ی رویت و شمارش با استفاده از استریومیکروسکوپ می‌باشند.

جهت تفسیر نتایج منحنی‌های بقای سلولی برای تجزیه و تحلیل داده‌ها ترسیم می‌شود. از روش‌های کلونوژنیک برای پاسخ دادن به انواع سؤالات، به ویژه در حوزه زیست شناسی سرطان استفاده می‌شود.

.

گروه های هدف استفاده از این محصول:

.

کلیه گروه های علوم پایه نظیر میکروب شناسی، ایمنی شناسی، ژنتیک پزشکی، پزشکی ملکولی، فیزیولوژی، علوم اعصاب، انگل شناسی و قارچ شناسی، علوم تشریحی و بیولوژی سلولی، بیوشیمی بالینی، تغذیه، زیست فناوری و نانوفناوری پزشکی میتوانند از این خدمت استفاده کنند. همچنین گروه های پزشکی، فارماکولوژی و علوم دارویی نیز می‌توانند از خدمات ارائه شده فوق در پژوهش‌های تحقیقاتی استفاده نمایند.