رنگ آمیزی گرم روش رایجی است که برای تمایز بین انواع مختلف باکتری ها بر اساس ترکیب دیواره سلولی آنها استفاده می شود. این روش شامل رنگ آمیزی باکتری ها با یک سری رنگ برای تعیین گرم مثبت یا گرم منفی بودن آنها است.

مراحل رنگ آمیزی گرم به شرح زیر است:

1. با قرار دادن مقدار کمی از کشت باکتری بر روی یک لام شیشه ای تمیز و اجازه دادن به خشک شدن در هوا، یک اسمیر باکتری تهیه کنید.

2. اسمیر باکتریایی را با عبور دادن لام از داخل شعله یا استفاده از یک فیکساتور مانند متانول ثابت کنید.

3. اسمیر باکتریایی را با کریستال ویولت، رنگ بنفش پر کنید و اجازه دهید حدود یک دقیقه بماند. این کار تمام باکتری های موجود در لام را لکه دار می کند.

4. لام را با آب بشویید تا کریستال بنفش اضافی از بین برود.

5. اسمیر باکتری را با محلول ید بپوشانید، که به عنوان یک ماده خشک کننده عمل می کند تا به بلور بنفش کمک کند تا به سلول های باکتری متصل شود. اجازه دهید یک دقیقه بماند.

6. لام را دوباره با آب بشویید تا ید اضافی آن گرفته شود.

7. اسمیر باکتریایی را با الکل یا استون بی رنگ کنید. این مرحله بسیار مهم است زیرا بین باکتری های گرم مثبت و گرم منفی تفاوت قائل می شود. باکتری های گرم مثبت رنگ بنفش را حفظ می کنند، در حالی که باکتری های گرم منفی رنگ بنفش را از دست می دهند.

8. اسمیر باکتریایی را با سافرانین، رنگ قرمز، مقابله کنید تا باکتری های گرم منفی صورتی رنگ شوند. اجازه دهید حدود یک دقیقه بماند.

9. لام را با آب بشویید تا سافرانین اضافی از بین برود.

10. قبل از بررسی زیر میکروسکوپ، اجازه دهید لام در هوا خشک شود. باکتری های گرم مثبت بنفش و باکتری های گرم منفی صورتی به نظر می رسند.

با انجام روش رنگ‌آمیزی گرم، میکروبیولوژیست‌ها می‌توانند به سرعت نوع باکتری موجود در نمونه را شناسایی کرده و در مورد گزینه‌های درمانی مناسب تصمیم‌گیری آگاهانه بگیرند.