انجام تست ظرفیت انتی اکسیدانی در ساینس بازار
انواع تست های تعیین ظرفیت انتی اکسیدانی در ساینس بازار توسط کارشناسان خبره آزمایشگاهی انجام میشود. شما پژوهشگران محترم میتوانید با ارسال نمونه مورد نظر خود در کمترین زمان نتایج ارزیابی ظرفیت انتی اکسیدانی نمونه خود را بدست آورید.
تست های انتی اکسیدانی قابل ثبت سفارش در ساینس بازار شامل تست های زیر میباشد. (با کلیک بروی هر تست ثبت سفارش کنید)
.
تست ظرفیت آنتی اکسیدانی به روش MDA چیست؟
استرس اکسیداتیو نتیجه عدم تعادل بین تولید وحذف گونههای فعال اکسیژن (ROS) توسط مکانیسمهای محافظتی است که میتواند منجر به التهاب مزمن شود. اعضای اصلی خانواده ROS شامل رادیکالهای آزادی مانند پراکسید هیدروژن، آنیونهای آزاد نیتروژن، و آنیونهای آزاد اکسیژن هستند که در سلولها به طور طبیعی تولید میشوند. این موارد ساختاری اتمی یا مولکولی است که دارای یک الکترون فرد است و ناپایدار است. در سلولهای سالم انسانی، این رادیکال ناپایدار قابلیت تبدیل شدن به پایدار را از طریق جفت شدن الکترون با ماکرومولکولهای زیستی مانند پروتئینها، لیپیدها و DNA دارد، که باعث آسیب به پروتئینها و DNA میشود. به دلیل کاهش سیستمهای آنتی اکسیدان در سلولی، آسیب سلولی ناشی از اینگونه رادیکالها ممکن است رایجتر شود. رادیکالهای آزاد میتوانند به سلولها و بافتها آسیب وارد کنند و MDA یکی از محصولات فرعی است که در طول این فرآیند پراکسیداسیون لیپیدی تولید میشود، جایی که لیپیدها (چربیها) در غشای سلولی توسط رادیکالهای آزاد آسیب میبینند. MDA در مطالعات invivo و invitro به عنوان یک مارکر گسترده برای ارزیابی استرس اکسیداتیو در زمینههای پزشکی برای انواع مختلف بیماریها از جمله فشار خون، دیابت، آترواسکلروز، نارسایی قلب و سرطان استفاده شده است. مالون دی آلدهید (MDA) بیشترین بیومارکر استرس اکسیداتیو استفاده شده در مشکلات بالینی مانند سرطان، اختلالات روانی، بیماری مزمن انسدادی ریه، آسم یا بیماریهای قلبی-عروقی است .در برخی از موارد بیماری مانند بیماران سرطان ریه، بیماران سندرم CRPS و بیماران گلوکوما، سطوح بالاتری از MDA گزارش شده است. یافتهها نشان میدهند که آزمون MDA به عنوان یک ابزار قابل اعتماد برای شناسایی استرس اکسیداتیو در مسیرهای مختلف بیماری موثر است.
کاربرد تست تعیین ظرفیت انتی اکسیدان
تمام سیستمهای زیستی دارای مکانیسمهای دفاع طبیعی آنتی اکسیدانی هستند و مصرف آنتی اکسیدانها برای محافظت از سلولها در برابر آسیب رادیکالهای آزاد حیاتی است. آنتی اکسیدانها مواد شیمیایی هستند که با انتقال الکترون از آنتی اکسیدانها به سلولهای آسیب دیده، آسیب ناشی از رادیکالهای آزاد را جلوگیری میکنند و آنها را پایدار میکنند. آنتی اکسیدانها همچنین رادیکالهای آزاد را به مواد پسماندی تبدیل میکنند که توسط بدن از بین میروند. مصرف میوهها و سبزیجات غنی از آنتی اکسیدان نشان داده شده است که خطر ابتلا به انواع مختلفی از بیماریهای ناشی از رادیکالهای آزاد را کاهش میدهد. با افزایش تولید ROS و یا کاهش فعالیت آنتیاکسیدانها، تعادل اکسیداتیو مختل میشود و استرس اکسیداتیو ایجاد میشود که میتواند به آسیب سلولی و بافتی منجر شود.
نقش انتی اکسیدان ها در بدن
این وضعیت در بسیاری از شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک اتفاق میافتد، از جمله:
۱. پیری: با پیری، قدرت سلولها در مقابل استرس اکسیداتیو کاهش مییابد و این موجب ایجاد آسیب در سلولها میشود.
۲. التهابات: التهابات میتوانند باعث افزایش تولید ROS شوند، که در نتیجه به استرس اکسیداتیو منجر میشوند.
۳. بیماریهای قلبی عروقی: استرس اکسیداتیو میتواند به تلفات در سلولهای قلبی منجر شود، که میتواند به بیماریهای مانند آنژین صدری و آنفارکتوس قلبی منجر شود.
۴. دیابت: در دیابت، سطوح بالای قند خون میتواند به تولید ROS منجر شود، که در نتیجه میتواند به آسیب سلولها و بافتهای مختلف از جمله عروق خونی و اعصاب منجر شود.
برای مقابله با استرس اکسیداتیو، استفاده از آنتیاکسیدانها مانند ویتامین C، ویتامین E، بتاکاروتن، و سلنیوم میتواند مفید باشد. همچنین، رژیم غذایی حاوی مواد غذایی با ظرفیت آنتیاکسیدانی بالا (مانند میوهها و سبزیجات) و فعالیت بدنی منظم نیز میتواند به کاهش استرس اکسیداتیو کمک کند. در سیستم آنتیاکسیدانی بدن سوپراکسید دیسموتاز (SOD) با تبدیل آن به پراکسید هیدروژن (H2O2) به بدن کمک میکند تا رادیکالهای سوپراکسید را حذف کند. کاتالازها همچنین فرایند تبدیل پراکسید هیدروژن به آب را فراهم میکنند.
سه روش اصلی بررسی ظرفیت آنتی اکسیدانی
سه روش اصلی بررسی ظرفیت آنتی اکسیدانی عبارتند از: آزمون DPPH (2,2-diphenyl1-picryl-hydrazyl-hydrate)، آزمون FRAP (Ferric reducing antioxidant power) و آزمون فعالیت جذب رادیکال آزاد پراکسید هیدروژن. (H2O2)
تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی به روش مالون دی الدهید MDA
به طور خاص، روش مالون دی آلدهید یک روش آنالیز شیمیایی است و به عنوان یک مارکر بیولوژیکی که در طول فرآیند پراکسیداسیون لیپیدی تولید می شود از آن برای ارزیابی استرس اکسیداتیو در بدن جهت شناسایی و اندازهگیری مقادیر کم سطوح MDA در نمونههای بیولوژیکی مختلف از جمله خون، ادرار یا بافتها استفاده میشود. برای انجام روش مالون دیآلدئید، نمونههای زیستی ابتدا به مواد اولیهای مانند تیوباربیتوریک اسید (TBA) وارد میشوند. سپس، در شرایط اسیدی و حرارت بالا، TBA با مالون دیآلدئید و سایر ترکیبات مربوطه واکنش میدهد که به وسیلهی جذب نوری یا فلورسانس اندازهگیری میشود. روش اسید تیوباربیتوریک (TBA)، روشی رایجترین برای تعیین سطح MDA در مایعات بیولوژیکی است. این آزمون بر اساس واکنش ترکیبی دو مولکول TBA با یک مولکول MDA انجام میشود، که سرعت این واکنش وابسته به دما، pH وغلظت TBA است. واکنش در محلول اسیدی و در دمای حدوداً 100 درجه سانتیگراد و طی یک ساعت صورت میگیرد و بیشتر MDA در طول فرآیند واکنش از تجزیه محصولات پراکسیداسیون لیپیدی تولید میشود. روش TBA از جمله روشهای آسان و با صرف وقت و هزینه کم میباشد که آن را به روشی متداول ترین در این زمینه تبدیل کرده است، با وجود برخی ملاحظات و محدودیتهای مرتبط با این روش وجود دارد.
این روش به عنوان یکی از معیارهای استرس اکسیداتیو در تحقیقات بیولوژیکی، فیزیولوژیکی، و سم شناسی بسیار مورد استفاده قرار میگیرد، زیرا اندازهگیری سطح MDA میتواند به ما کمک کند تا میزان آسیب سلولی ناشی از استرس اکسیداتیو را در نمونههای مختلف ارزیابی کنیم.
وسایل مورد نیاز سنجش میزان مالون دی آلدهید MDA
برای انجام سنجش میزان مالون دی آلدهید (MDA)، وسایل زیر معمولاً مورد نیاز هستند:
- اسید تیوباربیتوریک (TBA): این ترکیب شیمیایی برای انجام واکنش با MDA برای تشکیل MDA-TBA adduct استفاده میشود.
- ماده فرعی (Substrate): معمولاً یک ماده فرعی مناسب به همراه TBA برای تقویت نمونهها و انجام واکنش شیمیایی به کار میرود.
- نمونههای بیولوژیکی: این نمونهها میتوانند شامل سرم خون، بافت، سلولها و یا سایر مایعات بیولوژیکی باشند که میخواهید میزان MDA آنها را اندازهگیری کنید.
- ماده آغازگر (Sample Diluent): برای تقویت و آمادهسازی نمونههای بیولوژیکی قبل از انجام آزمون، نمونهها با ماده آغازگری مخلوط میشوند.
- وسایل آزمایشگاهی عمومی: شامل لولهها، پیپتها، سرنگها، نوارهای اندازهگیری نوری (اسپکتروفتومتر) با طول موج 535 نانومتر برای اندازهگیری جذب نوری MDA-TBA adduct.
- وسایل آزمایشگاهی خاص: مانند گرماکن، دستگاههای ترازو، مایعات تمیز کننده، و تجهیزات مورد نیاز برای آمادهسازی و اندازهگیری نمونهها.
- استانداردها و کنترلها: برای استانداردسازی دقیق آزمایش و بررسی صحت و دقت نتایج، استفاده از استانداردها و نمونههای کنترلی ضروری است.
این وسایل به طور کلی برای انجام روش سنجش میزان MDA استفاده میشوند و بسته به محیط آزمایشگاهی و شرایط مورد نیاز ممکن است جزئیات دیگری هم به آنها اضافه شود.
روش انجام تست مالون دی آلدئید:
سنجش میزان مالون دی آلدهید (MDA) معمولاً با استفاده از روشهای شیمیایی صورت میگیرد که به طور خاص بر پایه واکنش MDA با اسید تیوباربیتوریک (TBA) استوار است. مراحل کلی این روش به شرح زیر است:
- آمادهسازی نمونه: نمونههای بیولوژیکی مختلف (مانند سرم خون، بافت، سلول و …) جمعآوری و پس از تهیه، بهطور مناسب تقویت و آماده میشوند.
- تبدیل MDA به: MDA-TBA adduct نمونهها به همراه اسید TBA و سایر مواد فرعی مربوطه مخلوط میشوند. در این مرحله، اسید TBA با MDA واکنش میدهد و MDA-TBA adduct را تشکیل میدهد که دارای رنگ صورتی است.
- اندازهگیری رنگ: پس از تشکیل MDA-TBA adduct، رنگ صورتی تولید شده به وسیلهی جذب نوری در طول موج 535 نانومتر اندازهگیری میشود. این جذب نوری مستقیماً با میزان MDA در نمونه متناسب است.
- تفسیر نتایج: مقدار MDA در نمونه بر اساس جذب نوری اندازهگیری شده محاسبه میشود. معمولاً نتایج به صورت نانومول بر میلیمتر (nmol/mL) یا نانومول بر گرم بافت (nmol/g tissue) گزارش میشود.
- استانداردسازی: برای دقت بیشتر، نمونههای مختلف ممکن است با استفاده از استانداردهای آمادهسازی شده و اندازهگیری مجدد و تکرار شوند تا نتایج قابل اعتمادی بدست آید.
این روش به دلیل سادگی، حساسیت و قابلیت استفاده در مقیاسهای گوناگون، یکی از متداولترین روشهای سنجش میزان MDA در تحقیقات بیولوژیکی و پزشکی است که در مطالعه استرس اکسیداتیو و آسیبهای سلولی مورد استفاده قرار میگیرد.
گروه های هدف استفاده از سنجش میزان مالون دی آلدهید (MDA)
سنجش میزان مالون دی آلدهید (MDA) به عنوان یک مارکر اصلی آسیب اکسیداتیو در تحقیقات و بررسیهای بیولوژیکی و پزشکی بکار می رود.
- تحقیقات بیولوژیکی: برای ارزیابی سطح استرس اکسیداتیو در سلولها، بافتها، و انواع نمونههای بیولوژیکی دیگرمانند خون، مایعات بدن و اعضای مختلف بدن، از جمله مطالعات بر روی بیماریهای نورونی، قلبی عروقی، التهابات و بیماریهای مزمن.
- پزشکی تشخیصی: برای تشخیص بیماریهایی که باعث ایجاد استرس اکسیداتیو میشوند، مانند بیماریهای قلبی، مغزی، دیابت، بیماریهای التهابی، و بیماریهای نارسایی اعضای دیگر.
- پژوهشهای داروئی: برای ارزیابی تأثیرات آنتیاکسیدانها و داروهای مختلف بر سطح استرس اکسیداتیو و سلامت عمومی سلولها و انسجامهای بیولوژیکی.
- سم شناسی: برای ارزیابی تأثیرات مواد شیمیایی، سموم و آلایندهها بر استرس اکسیداتیو در سطوح مختلف سازمانهای بیولوژیکی و سیستمهای انسانی.
- صنعت مواد غذایی: برای ارزیابی اثرات مواد غذایی، مکملهای تغذیهای و تأثیرات رژیمهای غذایی بر سلامت استرس اکسیداتیو و سطوح MDA در بدن.
- مطالعات پژوهشی: برای استفاده در آزمایشگاههای تحقیقاتی و صنعتی برای مطالعات بیولوژیکی، شیمیایی و دارویی.
- برنامههای مراقبت از سلامت و پیشگیری: برای ارزیابی سطح استرس اکسیداتیو و ریسک بیماریهای مختلف به عنوان یکی از نکات مهم سلامتی و پیشگیری از بیماریها.
این موارد نشان میدهند که سنجش میزان MDA در بیولوژی و پزشکی یک ابزار قابل تنظیم و مفید برای مطالعه و درک اثرات استرس اکسیداتیو و سلامت عمومی است.
محدودیتهای استفاده از تست مالون دی آلدئید
۱. حساسیت به شرایط نگهداری: مالون دی آلدئید یک ترکیب فرار است که در دماهای بالا و در شرایط نگهداری نامناسب قابل تشکیل است. بنابراین، نمونههای جمعآوری شده باید به سرعت و در شرایط مناسب نگهداری شوند.
۲. تفسیر دقیق نتایج: نتایج این تست تحت تأثیر عوامل زیادی از جمله شرایط نگهداری، روشهای آزمایشی، و تکنیکهای اندازهگیری قرار میگیرند. لذا برای تفسیر صحیح نتایج، نیاز به استفاده از روشهای استاندارد و کنترل شده است.
۳. عدم انعطافپذیری: این تست فقط به اندازهگیری یک پارامتر خاص (مالون دی آلدئید) محدود است و نمیتواند اطلاعات کاملی در مورد وضعیت استرس اکسیداتیو بدن فراهم کند. برای تجزیه و تحلیل کاملتر، از تستهای دیگر نیز استفاده میشود.
۴. استفاده محدود در برخی شرایط بالینی: برخی از وضعیتهای بالینی مانند التهابات حاد، تروما، یا تغییرات شدید در ترکیب بدن ممکن است به نتایج این تست تأثیر بگذارند و باعث عدم قابلیت استفادهی اجمالی آن شوند.
با توجه به این محدودیتها، استفاده از تست مالون دی آلدئید باید با دقت و با توجه به شرایط خاص هر آزمایشگاه یا تحقیقات بالینی مدنظر انجام شود تا نتایج دقیق و قابل اعتمادی به دست آید.
مزیتهای استفاده از تست مالون دی آلدئید
1. اندازهگیری مستقیم استرس اکسیداتیو: مالون دی آلدئید به عنوان یک مارکر اصلی استرس اکسیداتیو، به وضوح نشان میدهد که چقدر لیپیدها در سلولها و بافتها دچار آسیب اکسیداتیو شدهاند. این اندازهگیری مستقیم و کمک میکند تا تأثیرات ناشی از فعالیت آنتیاکسیدانها و مواد آزاد رادیکالی در بدن مورد ارزیابی قرار گیرد.
۲. سادگی روش: تست مالون دی آلدئید از لحاظ فنی و اجرایی نسبتاً ساده است. این روش شامل تفکیک و اندازهگیری یک ترکیب شیمیایی است که در نمونههای بیولوژیکی مانند سرم خون، بافتها و سلولها قابل اندازهگیری است.
۳. استفاده گسترده در طرح های تحقیقاتی: این تست به طور گسترده در مطالعات علمی برای بررسی تأثیرات فعالیتهای فیزیولوژیکی، پاتولوژیکی و تأثیر درمانهای مختلف استفاده میشود. این امکان را میدهد که اثرات مختلف محافظتی یا آسیبزایی مانند اثرات داروها، مکملها، و رژیمهای غذایی را بر روی استرس اکسیداتیو بررسی کنیم.
۴. کاربرد در تشخیص برخی بیماریها: در برخی بیماریها مانند بیماریهای قلبی-عروقی، دیابت، بیماریهای التهابی و گرانولوماتوزیسها، سطح مالون دی آلدئید افزایش مییابد که میتواند به عنوان یک نشانگر بیماری یا پیشرفت بیماری مورد استفاده قرار گیرد.
۵. ارزیابی اثربخشی آنتیاکسیدانها: در مطالعات بالینی و تجربی، تست مالون دی آلدئید به عنوان یکی از معیارهای ارزیابی اثربخشی مواد آنتیاکسیدانی استفاده میشود. این به ارزیابی قابلیتهای محافظتی و ضد اکسیدانی مواد مختلف کمک میکند.
با این وجود، همانطور که قبلاً بیان شد، توجه به محدودیتها و شرایط صحیح استفاده از این تست بسیار حیاتی است تا نتایج دقیق و قابل اعتمادی به دست آید.
لینک مقالات مرتبط با موضوع:
- https://www.scielo.br/j/qn/a/3gSdW89C9qqLX9cDPB4WhMC/
- https://academic.oup.com/plphys/article-abstract/180/3/1246/6117500
- https://www.researchgate.net/profile/Kamal-Kachhawa/publication/279177641_A_Prognostic_Study_of_MDA_SOD_and_Catalase_in_Breast_Cancer_Patients/links/5850131a08aeb989252e97b7/A-Prognostic-Study-of-MDA-SOD-and-Catalase-in-Breast-Cancer-Patients.pdf
- https://www.researchgate.net/profile/Mohammad-Khan-73/publication/333942388_ESTIMATION_OF_THE_STATUS_OF_MDA_LEVELS_AND_SOD_ACTIVITY_IN_PREGNANT_WOMEN/links/5e1973b7299bf10bc3a3543f/ESTIMATION-OF-THE-STATUS-OF-MDA-LEVELS-AND-SOD-ACTIVITY-IN-PREGNANT-WOMEN.pdf
- https://iijls.com/currentissue/IJLSSR-1032.pdf
- https://www.academia.edu/download/88477323/524f314df483921aa3c7d08b0060b9af73b8.pdf
- https://www.mdpi.com/2076-3921/8/3/72